南京市总工会成立于1927年3月，是中国共产党领导下成立的南京第一个地方工会。
南京市总工会是中华全国总工会的地方组织，由南京市工会代表大会选举产生，是南京市各级工会组织的领导机关。
90多年来，随着南京工人阶级队伍由小到大、由弱变强，南京市总工会由成立之初的200多个基层组织、5万多名会员，发展到今天5.7万多个基层组织、232万多名会员，工会自身规模不断发展壮大。
目前，南京市总工会直属区总工会、产业（开发区、公司）工会、市级机关工会联合会35家，市总机关设置14个职能部门：办公室（研究室）、组织部、宣传教育部、权益保障部、劳动和经济工作部、基层工作部、网络工作部、法律工作部、女职工部（市总工会女职工委员会办公室）、财务部、审计处（市总工会经费审查委员会办公室）、资产管理部、机关党委、老干部处。
下属南京市工人文化宫、南京市职工技协办公室、南京市职工大学、南京市总工会干部学校、南京市职工宣传教育中心、南京市职工疗养院、南京市职工对外交流中心、南京市职工互助互济会、南京市职工服务中心、南京天丰投资管理有限责任公司、南京天丰企业发展集团中心、南京天丰大酒店等企事业单位。
南京市总工会网上办公提供OA办公、建会入会、爱心基金、部门管理等服务。
江苏省企业民主管理条例，中华人民共和国工会法，全国人民代表大会常务委员会关于修改《中华人民共和国劳动合同法》，的决定中华人民共和国劳动合同法实施条例，中华人民共和国劳动合同法实施《中华人民共和国社会保险法》若干规定，中国工会章程（2013年10月22日通过）社会保险基金行政监督办法，女职工劳动保护特别规定，社会保险行政争议处理办法，劳动行政处罚听证程序规定，违反《中华人民共和国劳动法》，行政处罚办法，社会保险基金监督举报工作管理办法，劳动行政处罚若干规定，劳务派遣暂行规定，城市居民最低生活保障条例，工伤保险条例，《中华人民共和国企业劳动争议处理条例》，若干问题解释未成年工特殊保护规定，禁止使用童工规定，《江苏省社会保险费征缴条例》，《江苏省集体合同条例》，《江苏省工资支付条例》，《江苏省工会劳动法律监督条例》，《江苏省安全生产条例》，工会常用法律法规汇编。
